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【图文导读】图1.IL-10+细胞外囊泡的制备和表征(A)用RFP标记的IL-10转染RAW细胞,新旧然后用地塞米松刺激(B)在工程RAW细胞中对IL-10(绿色)和EV标记CD63(红色)进行免疫染色(C)在IL-10+细胞外囊泡中对EV相关的(Alix,新旧CD63和CD81)和巨噬细胞相关的标志物(CD68和CD206)进行蛋白质印迹分析(D)IL-10+细胞外囊泡的尺寸分布和代表性TEM图像(E)显示从抗体阵列分析获得的每种细胞因子的蛋白质水平(F)细胞外囊泡中IL-10的ELISA分析,以及IL-10+细胞外囊泡中的IL-10和IL-10受体的蛋白质印迹分析(n=3或6)(G)通过实时定量PCR测量IL-10+细胞外囊泡中的IL-10mRNA(H-1)比较IL-10+细胞外囊泡和游离IL-10在不同条件下的稳定性,包括在37°C或-80°C下放置一周,在pH5.5溶液中12小时图2.肾靶向IL-10+EV(A)以亲代RAW细胞为对照的IL-10+EVs蛋白质组成的LC-MS/MS分析(B)蛋白质印迹分析(C-E)为了分析体内分布,给小鼠静脉注射DID标记的IL-10+EV(n=3)(C)注射后6、12、24、48和96小时(缺血时间35分钟)对指定器官的荧光强度成像(D)缺血20分钟,28分钟和35分钟的IRI肾脏在12小时时的荧光强度成像(E)代表性共聚焦图像显示DID标记的IL-10+EV在小管(包括近端小管和远端小管),内皮细胞(CD31)和巨噬细胞(CD68)中的蓄积(F-G)H/R诱导的TECs摄取PKH67标记的IL-10+EV(n=3)图3.IL-10+EV可预防小鼠的肾脏I/R损伤(A)实验设计示意图(B)IL-10+EV对血清肌酐的影响(n=10)(C)基于H&E染色的肾小管损伤的量化(n=10)(D)肾皮质和髓质的H&E染色的代表性图像(E-G)TUNEL染色和凋亡细胞定量的代表性图像(n=6)(F-H)代表性共聚焦图像和KIM-1+小管的定量(n=6)(I)肾脏组织中caspase-3的蛋白质印迹分析(n=3)(J)实时定量PCR分析肾脏组织中炎性细胞因子mRNA水平(n=6)图4.IL-10+EVs抑制mTOR信号传导并诱导线粒体保持线粒体稳态(A)肾组织中mTOR信号和LC3的蛋白质印迹分析(n=3)(B)肾小管自噬事件的代表性TEM图像(C-E)评估IL-10+EV对培养的TEC中线粒体功能的影响(n=3)(F)肾小管中线粒体的代表性TEM图像(G)肾脏切片中细胞色素C氧化酶亚基I(MT-CO1)表达的免疫组织化学分析(H)线粒体呼吸链复合体I的酶活性(n=6)图5.IL-10+EVs引起肾巨噬细胞表型转变(AB)分别用LPS,IL-4+IL-13或不同剂量的IL-10+EV刺激BMDM48小时(n=3)(C-E)IRI组与IL-10+EV组之间肾巨噬细胞表型变化的探讨图6.IL-10+EV抑制AKI-CKD转变(A)PAS染色的代表性图像(n=6)(B)矢状面Masson三色染色的代表性图像(n=6)(C)肾组织中胶原蛋白I和α-平滑肌肌动蛋白(β-SMA)的蛋白质印迹分析(n=4)(D)肾脏切片中CD68+巨噬细胞和CD3+T细胞的代表性共聚焦图像(n=6)(E)用于治疗缺血性AKI的IL-10+EV制剂的示意图【小结】细胞外囊泡(EVs)用作天然药物递送系统已引起强烈的研究兴趣。IL-10+EV的治疗不仅可靶向肾小管间质中的巨噬细胞,转换展的政策而且可靶向肾中的肾小管上皮细胞(TECs),转换展的政策可显著改善肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤,并防止AKI向CKD的转变。
但是,起步区关目前尚无明确的疗法来治疗AKI或阻止其发展为CKD。白介素10(IL-10)是一种功能强大的免疫调节剂,于促业具有强大的抗炎和组织再生能力。若干同时还报道了利用中空纤维系统大规模制备间充质干细胞源外泌体的新方法。
试行该成果以题为Extracellularvesicle–encapsulatedIL-10asnovelnanotherapeuticsagainstischemicAKI发表在Sci.Adv.上。济南进企文献链接:Extracellularvesicle–encapsulatedIL-10asnovelnanotherapeuticsagainstischemicAKI.Sci.Adv.,2020,DOI:10.1126/sciadv.aaz0748本文由tt供稿编辑。
因此,新旧基于EV的药物递送系统可能是推动IL-10用于AKI治疗的新型给药策略。
最近的研究表明,转换展的政策细胞外囊泡作为强大的纳米载体进行药物输送在化学治疗、基因治疗等领域展现出巨大的应用前景。国内基本都是86盒标准,起步区关固定基本都大同小异,重点来说一下接线,以及面板和底壳的衔接。
实际上,于促业体积小也是对一家公司研发实力的考验,因为底壳体积小,就必然要压缩内部空间,技术难度更大。在这场革命中,若干家中一切的设备都会被智能化,开关无疑首当其冲,所以如何选择正确的智能开关对家庭照明来说非常重要。
不过,试行不是好看就行,对产品品质起到一定作用的造型和材质也不容忽视。当然,济南进企工艺成色也很关键,从下图来看,且不说材质如何,A显然要比B更具质感。
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